核酸检测的具体操作，核酸检测是什么意思

一 、核酸检测操作流程有哪些

摘要：很多人以为核酸检测就是采集一下就完成了，其实核酸检测远比这复杂的多 ，核酸检测操作流程有采集分泌物
、进行留样、样本送检 、核酸提取
、荧光PCR核酸检测、核酸检测报告
，很多操作步骤都要手工进行，因此需要花费一定的时间 。核酸检测的原理是利用荧光定量PCR（聚合酶链式反应）
。接下来本文将简单介绍核酸检测操作流程有哪些以及核酸检测的原理是什么 ，一起来看看吧！一 、核酸检测操作流程有哪些

目前
，全国大部分城市都提供了核酸检测，那么 ，核酸检测要经过哪些步骤呢？下面一起了解下核酸检测操作流程有哪些：

1、采集分泌物

首先，医务人员会使用咽拭子擦拭受检者鼻腔或者喉咙扁桃体处
，采集唾液分泌物，这个过程其实蛮疼的。

2
、进行留样

将人体分泌物采集出来以后 ，咽拭子浸到保存液中
，将管子盖子旋好进行留样 。

3、样本送检

然后，将样本装入到干净的密封袋中封好 ，送到相关部分进行检测
。

4 、核酸提取

相关部门将送来的样本
，送到指定实验室做核酸提取实验。

(图片来源于 *** 侵删）

5
、荧光PCR核酸检测

核酸提取出来以后
，再使用荧光PCR进行检测使用，检测是否有扩增反应 ，也就是判断阴性还是阳性 。

6、出核酸检测报告

最后
，根据核酸检测的荧光PCR反应结果，得出核酸检测报告 ，本人查询结果即可。

二 、核酸检测的原理是什么

检测新型冠状病毒特异序列的 *** 最常见的是荧光定量PCR（聚合酶链式反应）
。因PCR反应模板仅为DNA，因此在进行PCR反应前
，应将新型冠状病毒核酸（RNA）逆转录为DNA。在PCR反应体系中，包含一对特异性引物以及一个Taqman探针 ，该探针为一段特异性寡核苷酸序列
，两端分别标记了报告荧光基团和淬灭荧光基团 。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；如反应体系存在靶序列 ，PCR反应时探针与模板结合
，DNA聚合酶沿模板利用酶的外切酶活性将探针酶切降解，报告基团与淬灭基团分离 ，发出荧光
。

每扩增一条DNA链
，就有一个荧光分子产生。荧光定量PCR仪能够监测出荧光到达预先设定阈值的循环数（Ct值）与病毒核酸浓度有关，病毒核酸浓度越高 ，Ct值越小 。不同生产企业的产品会依据自身产品的性能确定本产品的阳性判断值
。

二
、核酸检测具体步骤

1、核酸提取使用硅胶柱离心 、磁性硅胶颗粒分离 *** 以及自动化仪器等商品化试剂或设备并按说明书操作。提取RNA时应注意防止RNA降解 。DNA应置于-20℃保存
，RNA和需长期保存的DNA应置于-80℃保存
。

2
、逆转录合成cDNA。逆转录cDNA合成反应需使用逆转录引物、dNTPs 、逆转录酶
、RNA酶抑制剂、DTT 、缓冲液和适量无RNA/DNA酶的超纯水以及RNA模板 。在扩增仪或水浴箱中，在规定的温度和时间下进行逆转录反应
。

3、PCR扩增反应PCR反应需使用引物
、dNTPs、DNA聚合酶 、缓冲液
、和适量无RNA/DNA酶超纯水、以及模板。在扩增仪中 ，按照设定的程序进行扩增 。使用二次扩增的套式PCR扩增 *** 。

4 、扩增产物定性分析；扩增产物常用分析 *** 是琼脂糖凝胶电泳法，与分子量标准比较
，判断扩增片段是否在预期的分子量范围内
。其它扩增产物分析 *** 还有限制性内切酶酶切分析
、特异性探针杂交分析以及DNA序列分析等。

5、结果判定和完成报告单：每一次检测需同时做两个阳性对照 、两个阴性对照，只有阳性对照扩增出预期的片段
、阴性对照没有扩增出任何片段、双份平行样品结果一致的情况下实验才成立 ，可以作出核酸阳性或阴性反应结果的判定 。

扩展资料：

检测新型冠状病毒特异序列的 *** 最常见的是荧光定量PCR
。因PCR反应模板仅为DNA
，因此在进行PCR反应前，应将新型冠状病毒核酸逆转录为DNA。在PCR反应体系中 ，

包含一对特异性引物以及一个Taqman探针
，该探针为一段特异性寡核苷酸序列，两端分别标记了报告荧光基团和淬灭荧光基团 。探针完整时 ，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；

如反应体系存在靶序列
，PCR反应时探针与模板结合，DNA聚合酶沿模板利用酶的外切酶活性将探针酶切降解 ，报告基团与淬灭基团分离
，发出荧光
。

每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子产生。荧光定量PCR仪能够监测出荧光到达预先设定阈值的循环数与病毒核酸浓度有关 ，病毒核酸浓度越高， Ct值越小 。不同生产企业的产品会依据自身产品的性能确定本产品的阳性判断值
。

参考资料：百度百科——核酸检测法

三 、核酸检测操作流程分享

北京市现在为了彻底减少疫情出现
，已经开始全民做核酸检测了，目前大家做核酸检测十分的方便 ，那么要去哪里做呢？接下来我就给大家带来了核酸检测操作流程分享
，一起来看看吧！

核酸检测操作流程分享近期，随着北京疫情形势的变化 ，北京要求5月30日以来
，凡到过北京新发地农贸批发市场或与市场销售人员有过密切接触的人员，应主动向单位和社区报告 ，并开展核酸检测和居家观察
，如有发热
、咳嗽、咽痛等症状，应向单位和社区报告并及时就近前往设有发热门诊的医疗机构就诊。

目前 ，多家北京医院发布官方通知
，提醒市民至少提前一天预约，按照预约时段错峰就诊 。

此外 ，作为在疫情期间全国首家开放线上核酸检测预约服务的平台，京东健康之一时间响应疫情防控工作的需要
，目前通过京东健康线上平台，可以在线预约9个核酸检测网点的检测服务 ，网点覆盖北京市朝阳区 、海淀区和大兴区等多个地点
。

京东健康平台上可在线购买和预约的核酸检测服务
，均由北京市卫健委公布的面向团体和个人提供新冠病毒核酸检测的官方指定机构。用户通过京东APP搜索“核酸检测”，即可进入相关页面 ，提前购买检测服务并预约检测采样;采样完成后
，最快24小时内即可获取检测结果报告 。

四、核酸检测具体怎么做的

新型冠状病毒的核酸检测根据采样方式，大致分为上呼吸道标本和下呼吸道标本 ，上呼吸道标本主要为鼻咽拭子
、鼻咽抽取物
，下呼吸道标本主要是支气管肺泡灌洗液、深部痰液。其具体检测方式如下：

1 、鼻咽拭子：咽拭子是用两根一次性拭子，同时擦拭双侧咽
、扁桃体及咽后壁 ，来获得上呼吸道标本
，鼻拭子的采取部位为鼻道内、鼻腭处；

2 、深部痰液：要求患者深咳，将咳出的痰液收集后进行检测；

3
、鼻咽抽取物：将与负压泵相连的收集器头部插入鼻腔或气管 ，接通负压后抽取黏液标本；

4、支气管肺泡灌洗液：需要应用纤维支气管镜，是较为复杂的操作
。

目前常用的核酸检测筛查手段为鼻咽拭子。

▐检测【前】

做核酸检测前2小时尽量避免进食
，以免引起呕吐；采样前30分钟做到不喝饮料（包括不喝水） 、不吸烟
、不喝酒、不咀嚼口香糖等；临检要减少吞咽动作，不做清嗓子（例如咳痰吐痰）动作 。采集鼻咽拭子前 ，被检测者应告知采集人员是否有相关既往病史或相关事项
。例如鼻腔手术史 、鼻中隔弯曲
、血液病、咽喉疾病
，或服用抗凝药等相关危险因素；检测者需要正确佩戴口罩，检测前取下口罩 ，检测后立即戴好
，可准备一个备用口罩，污染后方便随时更换。

▐检测【中】

在采集口咽拭子时被检测者头后仰 ，张口发出“啊 ”音
，有助于暴露咽喉，但过程中会出现 *** 性干咳 、恶心、呕吐等症状 ，被检测者可配合采集人员尽量放松
、深呼吸；采集过程中可能出现鼻部酸痒感
， *** 打喷嚏，可立即用纸巾（提前备好）或手肘遮挡 。

▐检测【后】

采集后立即离开采集地点 ，避免在采集地点周围吐痰，呕吐
。核酸检测前后都需要注意手部卫生
，可使用免洗手消毒液或免洗酒精擦拭双手。

五、做核酸检测怎么做

新型冠状病毒的核酸检测根据采样方式，大致分为上呼吸道标本和下呼吸道标本 ，上呼吸道标本主要为鼻咽拭子 、鼻咽抽取物
，下呼吸道标本主要是支气管肺泡灌洗液
、深部痰液 。其具体检测方式如下：

1、鼻咽拭子：咽拭子是用两根一次性拭子，同时擦拭双侧咽 、扁桃体及咽后壁 ，来获得上呼吸道标本
，鼻拭子的采取部位为鼻道内
、鼻腭处；

2、深部痰液：要求患者深咳，将咳出的痰液收集后进行检测；

3 、鼻咽抽取物：将与负压泵相连的收集器头部插入鼻腔或气管 ，接通负压后抽取黏液标本；

4
、支气管肺泡灌洗液：需要应用纤维支气管镜
，是较为复杂的操作
。

目前常用的核酸检测筛查手段为鼻咽拭子。

▐检测【前】

做核酸检测前2小时尽量避免进食，以免引起呕吐；采样前30分钟做到不喝饮料（包括不喝水）、不吸烟 、不喝酒
、不咀嚼口香糖等；临检要减少吞咽动作 ，不做清嗓子（例如咳痰吐痰）动作 。采集鼻咽拭子前
，被检测者应告知采集人员是否有相关既往病史或相关事项
。例如鼻腔手术史、鼻中隔弯曲 、血液病、咽喉疾病，或服用抗凝药等相关危险因素；检测者需要正确佩戴口罩 ，检测前取下口罩，检测后立即戴好
，可准备一个备用口罩，污染后方便随时更换。

▐检测【中】

在采集口咽拭子时被检测者头后仰 ，张口发出“啊
”音
，有助于暴露咽喉，但过程中会出现 *** 性干咳
、恶心、呕吐等症状 ，被检测者可配合采集人员尽量放松 、深呼吸；采集过程中可能出现鼻部酸痒感
， *** 打喷嚏，可立即用纸巾（提前备好）或手肘遮挡 。

▐检测【后】

采集后立即离开采集地点 ，避免在采集地点周围吐痰
，呕吐。核酸检测前后都需要注意手部卫生，可使用免洗手消毒液或免洗酒精擦拭双手
。